1. qRT-PCR实验介绍

1.1 实验原理

实时荧光定量PCR （Quantitative Real-time PCR）是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应（PCR）循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。Real-time PCR是在PCR扩增过程中，通过荧光信号，对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期，模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系，所以成为定量的依据。

1.2 特点

实时、定量、荧光

2. Western Blot实验步骤

2.1 荧光定量PCR仪器 ABI-7300

2.2 相对定量（需要内参基因）

2.2.1  染料法原理：

SYBR Green 1 结合到双链DNA的小沟部位

SYBR Green 1 染料只有和双链DNA结合后才发荧光

2.2.2 按照体系加入PCR反应

2.2.3 获得扩增曲线和熔解曲线

2.2.4 数据分析

Ct值数据处理

以一个基因的不同时间点表达为例，如下表结果

每个点获得平均值和方差，做柱形图。