1. 玻璃器皿的清洗流程
锥形瓶、平皿、试管、离心管:带菌的固体培养基,枪头取出放入废液盒中,集中加热煮沸,等凝固后倒入垃圾桶;带菌的液体培养基,集中倒入废液盒中,加热煮沸,稍凉后导入水池。试管刷沾取洗洁精清洗,自来水冲洗干净,蒸馏水润洗,晾干。
电泳玻璃板清洗:自来水冲洗两侧碎胶,沾洗洁精手掌搓洗,自来水大量冲洗,蒸馏水正反冲洗,三次,晾干。
2. 高压锅灭菌流程
封口或报纸包好的器皿或配置好的溶液(盖子松开)准备灭菌,先检查高压锅水是否没过铜丝,放入待灭菌物品,时间15-20min,温度121.3℃,放气阀打开,打开开关,当有蒸汽时关放气阀,当音乐响时,关开关,待压力降为0 Pa时,松开盖子,取出物品。
3. 配置试剂pH调节(雷磁)
确定所调待测液pH,采用两点矫正法,若为酸性即用标准液pH 6.86和pH 4.0,若为碱性即用pH 6.86和pH 9.18校准。
洗瓶冲洗探头 滤纸擦干 放入标准液 选择校准键 稳定后按确认键 冲洗干净滤纸擦干 放入待测液
4. 常见溶液配制
(1)LB培养基
液体 胰蛋白胨 (Tryptone) 10g
酵母粉(Yeast Powder) 5 g
NaCl 10g
蒸馏水定容至1L
固体 250mL液体+ 2.8g Agar
(2)Tris-HCl (母液) pH 8.0
1M 0.5M
Tris 24.228g 2.114g
浓HCl 8mL 4mL
定容 200mL 200mL
注意:现将Tris溶于180mL水中,待完全溶解后加入HCl,再调pH值定容。
(3) EDTA母液 pH 8.0
0.5M 0.25M
EDTA 37.224g 18.612g
NaOH(颗粒) 3.6g 1.8g
定容 200mL 200mL
注意:此溶液pH值接近8.0时才溶解,最后用稀NaOH调节。
5. 超声破碎仪使用
打开开关 洗瓶冲洗探头 滤纸擦干 探头放入待超液(冰上) Set键及方向键调节功率及时间 Enter确认 启动超声
注意:超声杆探头不能空载,超声功率可以随时调节
6. 半干转仪及配套电泳仪使用
按照滤纸、膜、凝胶、滤纸的顺序放好,改好安全盖,调节电压(电流)及时间,电泳仪电压不能超过25V。
使用完毕后关闭电泳仪,擦干电极平台。
7. Sigma 离心机使用
容积 转子型号 最大转速
1.5mL/2mL 角12110 30.000 rpm / 64.397 x g
10mL 角12111 26.000 rpm / 57.438 x g
50mL 角12150 1.000 rpm / 41.415 x g
80mL 角12155 20.000 rpm / 40.695 x g
96孔板 水平11222 3.000 rpm / 1.238 x g
注意事项:
(1)根据样品体积选择正确的离心转子及转速。
(2)用天平完全配平后再离心。
(3)一定要在达到预设转速后,才能离开离心机,若有任何异状,要立刻停机。
(4)离心机使用完毕后,打开盖子晾干或用软布擦干后再盖上盖子。