1仪器：HP1100液相色谱仪，超声波清洗仪，分析天平（1/10万），高速离心机，10mL容量瓶，0.45微米滤膜。

2试剂：

2.1甲醇：色谱纯

2.2乙腈：色谱纯

2.3磷酸

2.4二甲基亚砜

2.5 80%甲醇：80mL甲醇加纯净水20mL混匀即可。

2.6 PH3.0的磷酸水溶液：596mL哇哈哈纯净水加100微升磷酸即可。

2.7 50%二甲基亚砜溶液：50mL二甲基亚砜加纯净水50mL混匀即可。

2.8大豆异黄酮标准品储备液的配制：精密称取一定量的大豆苷、染料木素、黄豆黄苷、大豆苷元标准品于10mL容量瓶中，加入50%的二甲基亚砜溶液至接近刻度，超声处理30分钟，再用50%的二甲基亚砜溶液定容。

2.9大豆异黄酮混合标准使用液：将配制好的大豆苷、染料木素、黄豆黄苷、大豆苷元标准品储备液等量混合后，再做倍比稀释成不同浓度的混合标准使用液。

3样品处理：

3.1固体、半样品：固体样品粉碎磨细，过80目筛，混匀。半固体样品混匀。称取0.05-0.5克，放入50mL容量瓶中加80%甲醇溶解后定容至接近刻度。

3.2液体样品：吸取混匀的液体样品0.5mL-5.0mL于50mL容量瓶中，加80%甲醇溶解后定容至接近刻度

3.3将上述样品超声振荡20分钟，用80%甲醇定容至刻度，混匀。取样品溶液于离心管中，10000转/分，离心15分钟，上清液过0.45微米滤膜备用。

4样品测定

4.1色谱条件

色谱柱：C₁₈ ODS-2(4.6mm×150mm,5um)，流速：1mL/min    波长：260nm   柱温：30℃

流动相：A乙腈   B磷酸水溶液（PH3）   进样量：20µL

梯度洗脱表

4.2测定：

4.2.1定性：分别将大豆苷、染料木素、黄豆黄苷、大豆苷元的标准储备液做10倍稀释后按上述色谱条件（4.1）进行测定，依据单一标准品的保留时间，对样品中的组分进行测定。

4.2.2定量：将大豆异黄酮混合标准使用液（2.9）在色谱条件（4.1）下进行测定，以峰面积为纵坐标、标准品的含量为横坐标做标准曲线，由标准曲线得出样品组分的含量。

5精密度：在重复条件下，两次独立测定结果之差不得超过算术平均值的10%。