1.细胞复苏的原则

 在实际操作中，冻存细胞要进行复苏，再培养传代。复苏细胞一般采用快速融化法。以保证细胞外结晶快速融化，以避免慢速融化水分渗入细胞内，再次形成胞内结晶损伤细胞。

2.细胞复苏的操作步骤 

2.1从液氮罐中取出冷冻管。 

2.2迅速放入37～40℃水浴中，并不时摇动，在1min内使其完全融化。

2.3在1000r/min速度下离心7min，弃去上层液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，置37℃温箱静置培养，次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代。

3.注意事项 

在细胞复苏操作时，应注意融化冻存细胞速度要快，可不时摇动冷冻管，使之尽快通过最易受损的温度段(-5～0℃)。这样复苏的冻存细胞存活率高，生长及形态良好。然而，由于冻存的细胞还受其他因素的影响，有时也会有部分细胞死亡。此时，可将不贴壁、飘浮在培养液上(已死亡)的细胞轻轻倒掉，再补以适量的新培养液，也会获得较为满意的结果。