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Applied Biosystems™ QuantStudio™ 6 实时定量PCR仪
技术服务——实验操作具体流程
一、实时荧光定量PCR的定义
实时荧光定量PCR是一种实时监控核酸扩增的技术,在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号的变化对PCR过程进行实时监控,以此实现对初始模板的定量分析。
二、可进行的项目
Applied Biosystems™ QuantStudio™ 6 实时定量PCR仪可以进行绝对定量、相对定量和基因分型项目。
绝对定量检测是根据标准曲线对未知样品进行的定量,是通过样品的Ct值和标准曲线进行比较实现的,分析的结果是给定数量的样品中(给定数量的细胞,每μg总RNA)中核酸的量(拷贝数、微克)。
相对定量用于分析特定样品相对于参照样品(比如,未处理的对照组)某个基因表达量的变化。分析结果是在相当量的试验组(样品A)和对照组(样品 B)中一个靶基因的相对比率(倍数差异)。科研人员更多利用相对定量检测mRNA的相对含量以比较两者或多者之间的表达差异。
通过实时荧光定量PCR进行基因分型是一种快速、可靠的方法,广泛用于确认SNP和CNV以及数百甚至数百万样本中的少量标记。
三、具体操作流程
1. 打开外接电源开关:将此不间断电源插上插座,然后打开此电源开关。
2.
打开计算机,待开机完成后再打开Applied Biosystems™ QuantStudio™ 6 主机电源。
3. 电脑账号和密码:INSTR-ADMIN和INSTR-ADMIN。
4. 三个项目的具体操作流程见附件。