LEICA CM1900型冰冻切片机操作规程

一、操作方法

1、开机

(1) 利用主机右侧的开关开启电源，用箱体温度设置按钮将切片机温度设置到切片所需温度，当设置温度时温度显示窗口显示设置温度，设置停止5秒后显示实际温度。只要按下箱体温度设置按钮，即可随时检查设置温度。样品头温度设置按同样方法进行。若样品头设为最低温度(-50度)，则按样品头最低温度设置按钮即可。

(2)第一次开机利用基准时间设置按钮设置一个基准时间，一般为北京时间，利用除霜时间设置按钮设置一除霜时间，一般为晚上12时左右，如果在该时间切片，应将时间推迟，当设置除霜时，时间显示窗口显示除霜时间，5秒后显示基准时间。手动除霜时先按下手动除霜按钮，听到峰鸣音后，按箱体温度设置按钮，则箱体手动除霜;如按箱体温度设置按钮，箱体手动除霜，按此顺序再按一次可关闭手动除霜，如按样品头温度设置按钮，则样品头除霜，按此顺序在按一次关闭。

2、切片

(1)利用切片机的厚度调节旋钮调节切片厚度，调整切片角度，安装切片刀。如是一次性刀片，请利用刀架的左右移动来使用不同的刀口，勿移动刀片。

(2)将样品放到样品托上，利用包埋剂固定，放到冷台上冷冻，在即将完全冷透前用热交换装置压平。

(3) 将冷却透的样品放到样品头上，设置样品头温度，用样品快进按钮将样品移近刀口，调整要切的平面，利用慢进按钮开始修片，修好后即可放下防卷板切片，如有需要可调节防卷板的上下位置，使切出的样品平整的进入防卷板与刀片的狭缝，取出后染色观察。

二、注意事项

1、速冻:是冰冻切片的关键，因为只有速冻才能减少组织内的冰品，最好的办法是将冷冻头放入液氮内冷冻。在液氮里冷冻要注意不要冻过头，只要看到3/4的组织已经冻住就可以了，待冷冻头拿出后刚好全部冻住，否则就会引起组织发脆，或冷冻头与组织分离。

2、固定:切片后应立即放入甲醇中固定，不能等切片干后再固定，这样容易造成细胞退变。固定液有很多，经我们实践后发现甲醇作用快，收缩小，染色较清晰，是冰冻切片最理想的固定液。

3、包埋剂:可用普通胶水代替，但要加入适量的水。太稀了，容易损伤切片刀:太了，粘在切片上不容易洗掉，影响切片的质量。

4、冰冻用切片刀一定要磨快，并且要磨直，否则切出的片子就不平整。

5、组织发脆后可等几分钟后再切，也可用手在组织上摸几下，如果用手摸，最好戴手套，或用玻片间的纸夹在手与组织之间，以防感染。