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标准化流程与成功技术案例

L-8900氨基酸分析仪检测氨基酸标准流程

发布时间:2017-06-30 16:55:33    阅读次数:747  

1仪器:L-8900氨基酸分析仪,微波消解仪,分析天平,离心机

2试剂:

2.1氨基酸标准品(2nmoL,脯氨酸为4nmoL):取氨基酸标准品原液(含18种氨基酸)0.2mL,于5mL容量瓶中,定容至刻度。可在4℃冰箱中保存一个月。

2.2 6N盐酸:市售盐酸与哇哈哈纯净水等量混合即可。

2.3 0.02N盐酸:取50mL纯净水于1000mL容量瓶中,加1.67mL盐酸,定容至刻度。

2.4 5%磺基水杨酸:称取磺基水杨酸5克放入100mL容量瓶中,用纯净水定容至刻度。

3样品处理:

3.1水解氨基酸:

3.1.1固体:称取一定量的样品(小于0.5克)于消解罐中,加入6N的盐酸5毫升,放入微波消解仪中进行消解,条件为:爬升时间15分钟,温度160度,功率600W,消解时间40分钟。消解完后过滤,用6N盐酸定容5毫升,离心3000转/分,20分钟,取适量上清过0.45微米针筒式滤器,用0.02N盐酸做一定的稀释于氨基酸样品瓶中(不能少于1毫升),上机检测。

3.1.2液体:用0.02N盐酸将样品稀释3倍或更低(视样品中氨基酸浓度而定),过0.45微米滤膜,备用。

3.2游离氨基酸:用5%磺基水杨酸,按1:3的比例与样品混合离心去蛋白(2万转/分,15分钟),取上清过过0.45微米滤膜,备用

4样品检测:处理好备用的样品上L-8900氨基酸分析仪检测。