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标准化流程与成功技术案例

细胞的冻存

发布时间:2017-06-30 16:58:03    阅读次数:515  

细胞冻存操作步骤: 

1.选择处于对数生长期并铺满瓶底的贴壁细胞,去掉培养瓶中上清液,加入胰蛋白酶EDTA消化液,待细胞收缩为圆形时倒掉消化液,加入1mL细胞冻存液(0.9mL小牛血清+0.1mL二甲基亚砜)。用吸管反复吹打瓶壁细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮细胞不需要消化处理一步。

2.将细胞悬液移至冻存管中。

3.将冷冻管盖子盖紧,并标记好细胞名称、冻存日期和操作人名字。 

4.将装好冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放4h左右,移入液氮提篮中。

5.细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,最好取出一株细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。